برای مشاهده نمونههای بالینی در زیر میکروسکوپ، از تکنیکهای متفاوتی استفاده میشود. به کلی، معمولا میکروارگانیسمها را نمیتوان بدون رنگ آمیزی در زیر میکروسکوپ مشاهده کرد (به جز در مواردی خاص، که از میکروسکوپ با مود زمینه تاریک استفاده میشود).
در بررسی میکروارگانیسمها، از رنگهای متفاوتی استفاده میشود، که براساس هدف معینی انتخاب میشوند. به طور کلی، تغییر رنگ، یک معیار تشخیص است. از رنگها به علاوه برای تشخیص کیفی حضور یا عدم حضور گونههای خاص در محیط هم استفاده میشود.
یکی از رایجترین رنگ آمیزیها، رنگآمیزی گرم (Gram’s stain) است. رنگ آمیزی گرم برای اولین بار توسط کریستین گرم ابداع شد. رنگ آمیزی گرم به روش زیر انجام میشود:
لایه نازکی از نمونه باکتری رشد کرده را روی یک صفحه لام گسترش میدهند. بهتر است نمونه از کنارههای لام، فاصله داشته باشد. برای نمونههای رقیق، ابتدا سانتریفیوژ انجام میشود، بعد از آن گسترش تهیه میشود.
آنچه روی لام قرار میگیرد، باید در مجاورت هوا خشک شود. برای نمونههای خطرناک، در اتاق ایمن این کار انجام میشود.
با عبور دادن لام از روی شعله (3-4 مرتبه) و یا با استفاده از صفحه گرم کننده، نمونه بر روی لام تثبیت میشود. گاهی از الکلها برای تثبیت نمونه استفاده میشود.
رنگ آمیزی
برای رنگ آمیزی گرم، ابتدا سطح گسترش را به مدت 1 دقیقه با رنگ کریستال ویوله پوشش داده میشود. سپس با آب شست و شو داده میشود. سپس سطح را به مدت 1 دقیقه با محلول لوگل (محلول ید) پوشش میدهند. سپس سطح گسترش با آب شسته میشود. با رنگ بر (مثلا استن یا الکل)، لام را شست و شو میدهند تا دیگر رنگ کریستال ویوله خارج نشود (حدود 10 ثانیه). سپس، لام با آب شست و شو داده میشود و سطح گسترش را با سافرانین به مدت 1 دقیقه میپوشانند. سپس شست و شو با آب انجام میشود. و در نهایت لام را خشک میکنند.
حال رنگ آمیزی انجام شده است و میتوان نمونهها را در زیر میکروسکوپ دید.
در زیر میکروسکوپ نوری، باکتریهای گرم منفی به رنگ صورتی دیده میشوند و باکتریهای گرم مثبت به رنگ آبی تیره (تا بنفش) دیده میشوند.
برای درک بهتر رنگ آمیزی گرم برای باکتریها، میتوانید ویدیوی زیر را نگاه کنید.
متیلن بلو یا متیل تیونینیوم کلرید یک ترکیب شیمیایی آروماتیک هتروسیکلیک با فرمول شیمیایی C16H18N3SCl است. متیلن بلو جامدی سبز رنگ و بی بو است که قابلیت انحلال در آب را داشته و محلولی آبی رنگ ایجاد می کند. این رنگ پایه، در زمینه های متنوعی کاربرد دارد. رایج ترین کاربرد متیلن بلو به عنوان […]
آب اکسیژنه یا هیدروژن پراکسید مادهای است که امروزه کاربردهای بسیار زیادی دارد. این ماده بیشتر به عنوان ضدعفونی کننده و سفیدکننده استفاده میشود. این ماده بیشتر به صورت غلیط آن یافت میشود و در کاربردهایی بسیاری نیاز است که این ماده رقیق گردد. برای رقیق کردن آن حتما لازم است از آب مقطر استفاده […]
کاربرد کربن فعال در تصفیه آب طعم و بوی نامطبوع آب از جمله مشکلاتی است که باعث غیرقابل مصرف شدن آب آشامیدنی می شود. یکی از روش های کارآمد برای رفع این آلودگی ها از آب، استفاده از فیلترهای حاوی کربن فعال است که با عبور آب از میان فیلتر، آلاینده ها جذب کربن فعال […]
تکنولوژی کاهش سرعت پرتو (Beam Deceleration Technology) در تصویربرداری SEM با بالاترین قدرت تفکیک از نمونه های زیستی بدون تخریب آنها می باشد. دراین فناوری، یک ولتاژ بایاس منفی روی نمونه اعمال می شودکه باعث کاهش انرژی پرتو فرودی می شود. در نتیجه الکترون های ساطع شده از نمونه اعم از بازگشتی و ثانویه […]