برای مشاهده نمونههای بالینی در زیر میکروسکوپ، از تکنیکهای متفاوتی استفاده میشود. به کلی، معمولا میکروارگانیسمها را نمیتوان بدون رنگ آمیزی در زیر میکروسکوپ مشاهده کرد (به جز در مواردی خاص، که از میکروسکوپ با مود زمینه تاریک استفاده میشود).
در بررسی میکروارگانیسمها، از رنگهای متفاوتی استفاده میشود، که براساس هدف معینی انتخاب میشوند. به طور کلی، تغییر رنگ، یک معیار تشخیص است. از رنگها به علاوه برای تشخیص کیفی حضور یا عدم حضور گونههای خاص در محیط هم استفاده میشود.
یکی از رایجترین رنگ آمیزیها، رنگآمیزی گرم (Gram’s stain) است. رنگ آمیزی گرم برای اولین بار توسط کریستین گرم ابداع شد. رنگ آمیزی گرم به روش زیر انجام میشود:
لایه نازکی از نمونه باکتری رشد کرده را روی یک صفحه لام گسترش میدهند. بهتر است نمونه از کنارههای لام، فاصله داشته باشد. برای نمونههای رقیق، ابتدا سانتریفیوژ انجام میشود، بعد از آن گسترش تهیه میشود.
آنچه روی لام قرار میگیرد، باید در مجاورت هوا خشک شود. برای نمونههای خطرناک، در اتاق ایمن این کار انجام میشود.
با عبور دادن لام از روی شعله (3-4 مرتبه) و یا با استفاده از صفحه گرم کننده، نمونه بر روی لام تثبیت میشود. گاهی از الکلها برای تثبیت نمونه استفاده میشود.
رنگ آمیزی
برای رنگ آمیزی گرم، ابتدا سطح گسترش را به مدت 1 دقیقه با رنگ کریستال ویوله پوشش داده میشود. سپس با آب شست و شو داده میشود. سپس سطح را به مدت 1 دقیقه با محلول لوگل (محلول ید) پوشش میدهند. سپس سطح گسترش با آب شسته میشود. با رنگ بر (مثلا استن یا الکل)، لام را شست و شو میدهند تا دیگر رنگ کریستال ویوله خارج نشود (حدود 10 ثانیه). سپس، لام با آب شست و شو داده میشود و سطح گسترش را با سافرانین به مدت 1 دقیقه میپوشانند. سپس شست و شو با آب انجام میشود. و در نهایت لام را خشک میکنند.
حال رنگ آمیزی انجام شده است و میتوان نمونهها را در زیر میکروسکوپ دید.
در زیر میکروسکوپ نوری، باکتریهای گرم منفی به رنگ صورتی دیده میشوند و باکتریهای گرم مثبت به رنگ آبی تیره (تا بنفش) دیده میشوند.
برای درک بهتر رنگ آمیزی گرم برای باکتریها، میتوانید ویدیوی زیر را نگاه کنید.
کلروفرم چیست؟ کلروفرم گازی بیرنگ با فرمول شیمیایی CHCL3 است. این ماده از استون و اتانول از طریق اثر پودر سفیدکننده کلر(هیپوکلریت کلسیم) تولید نمود. بخار آن سمی و اعتیاداور است و تنفس طولانی آن کشنده است. در گذشته به عنوان بیهوشکننده (اولین بار در زایمان) مورد استفاده قرار میگرفت. کلوروفرم اولین بار توسط سه […]
بوریک اسید بوریک اسید یک اسید معدنی سه ظرفیتی با فرمول شیمیایی H3BO3 است. در شکل زیر ساختار شیمیایی بوریک اسید دیده میشود. بوریک اسید از نظر حالت فیزیکی در دمای اتاق، مایع است و رنگ ندارد. این ترکیب، قابلیت انحلال در آب را دارد. نحوه تولید بوریک اسید بوریک اسید، یک اسید ضعیف لوئیس […]
از آنجایی که ممکن است همه امکان دسترسی به محلول ضدعفونی کننده دست را نداشته باشند و نتوانند آن را به صورت مستقیم خریداری کنند. بر آن شدیم تا مقاله ای درباره تهیه محلوول ضدعفونی کننده دست خانگی بنویسم. محتویات این مقاله عمدتا بر اساس فرمولاسیون و توصیه های سازمان بهداشت جهانی (WHO) برای تهیه […]
همه ما انواع مختلفی از ظروف آزمایشگاهی را در آزمایشگاه های شیمی دیده ایم و ممکن است برایمان سوال شده باشد چرا اینهمه ظرف مختلف در آزمایشگاه هست و آیا واقعا همه آنها استفاده می شوند؟ در مقاله پیشرو قصد داریم به معرفی اولیه ظروف آزمایشگاهی بپردازیم و انواع آنها را خیلی مختصر توضیح دهیم. […]