برای مشاهده نمونههای بالینی در زیر میکروسکوپ، از تکنیکهای متفاوتی استفاده میشود. به کلی، معمولا میکروارگانیسمها را نمیتوان بدون رنگ آمیزی در زیر میکروسکوپ مشاهده کرد (به جز در مواردی خاص، که از میکروسکوپ با مود زمینه تاریک استفاده میشود).
در بررسی میکروارگانیسمها، از رنگهای متفاوتی استفاده میشود، که براساس هدف معینی انتخاب میشوند. به طور کلی، تغییر رنگ، یک معیار تشخیص است. از رنگها به علاوه برای تشخیص کیفی حضور یا عدم حضور گونههای خاص در محیط هم استفاده میشود.
یکی از رایجترین رنگ آمیزیها، رنگآمیزی گرم (Gram’s stain) است. رنگ آمیزی گرم برای اولین بار توسط کریستین گرم ابداع شد. رنگ آمیزی گرم به روش زیر انجام میشود:
لایه نازکی از نمونه باکتری رشد کرده را روی یک صفحه لام گسترش میدهند. بهتر است نمونه از کنارههای لام، فاصله داشته باشد. برای نمونههای رقیق، ابتدا سانتریفیوژ انجام میشود، بعد از آن گسترش تهیه میشود.
آنچه روی لام قرار میگیرد، باید در مجاورت هوا خشک شود. برای نمونههای خطرناک، در اتاق ایمن این کار انجام میشود.
با عبور دادن لام از روی شعله (3-4 مرتبه) و یا با استفاده از صفحه گرم کننده، نمونه بر روی لام تثبیت میشود. گاهی از الکلها برای تثبیت نمونه استفاده میشود.
رنگ آمیزی
برای رنگ آمیزی گرم، ابتدا سطح گسترش را به مدت 1 دقیقه با رنگ کریستال ویوله پوشش داده میشود. سپس با آب شست و شو داده میشود. سپس سطح را به مدت 1 دقیقه با محلول لوگل (محلول ید) پوشش میدهند. سپس سطح گسترش با آب شسته میشود. با رنگ بر (مثلا استن یا الکل)، لام را شست و شو میدهند تا دیگر رنگ کریستال ویوله خارج نشود (حدود 10 ثانیه). سپس، لام با آب شست و شو داده میشود و سطح گسترش را با سافرانین به مدت 1 دقیقه میپوشانند. سپس شست و شو با آب انجام میشود. و در نهایت لام را خشک میکنند.
حال رنگ آمیزی انجام شده است و میتوان نمونهها را در زیر میکروسکوپ دید.
در زیر میکروسکوپ نوری، باکتریهای گرم منفی به رنگ صورتی دیده میشوند و باکتریهای گرم مثبت به رنگ آبی تیره (تا بنفش) دیده میشوند.
برای درک بهتر رنگ آمیزی گرم برای باکتریها، میتوانید ویدیوی زیر را نگاه کنید.
احتمالا شما هم تا بحال اسم موادی مانند آب ژاول، آب اکسیژنه و آب مقطر را شنیده اید و با خود فکر کرده اید که این مواد چی هستند و تفاوتشان در چیست. در مقاله پیش رو قصد داریم هرکدام از این مواد را معرفی کرده و با یکدیگر مقایسه کنیم. در ادامه به معرفی […]
سوسکها موجوداتی موذی هستند و از زمانی از تخم در میآیند تا زمانی که بالغ شوند، به لحاظ اندازه رشد دارند و ممکن است سوسکها را در محیط زندگی خود با ابعاد و ظاهر متفاوت ببینیم. انواع مختلف سوسکها برای سازگاری با شرایط زندگی و مقابله با شکارچیهای احتمالی، سطح بالههای پشتی شان ممکن است […]
در این مقاله توضیحاتی پیرامون انواع میکروسکوپ های مختلف و مقایسه میکروسکوپ ها داده خواهد شد. میکروسکوپهای الکترونی ابزاری مناسب و کارآمد برای کسب اطلاع از ساختار مواد در دنیای نانو هستند. آنها با توجه به ماهیت نور مرئی و اساس کار میکروسکوپهای نوری نسبت به این گونه میکروسکوپها ارجحیت دارند. همان طور که میدانید […]
کود چیست؟ به هرنوع ماده آلی، معدنی یا بیولوژیکی که دارای عناصر غذایی باشد و باعث بالابردن حاصلخیزی خاک یا افزایش عملکرد کیفی و کمی محصول شود، کود گفته میشود. کودها به طور کلی به سه دسته تقسیم میشوند: کودهای شیمیایی کودهای آلی یا ارگانیک کودهای بیولوژیک یا زیستی کودهای شیمیایی یکی از انواع مهم […]